99久久综合狠狠综合久久Aⅴ,美欧Va免费视频,久久久久亚洲精品无码网址色欲,精品日本一区二区三区免费

產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:RLE-6TN大鼠肺泡II型細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號:P-X1147
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
你添加了1件商品 查看購物車
簡單介紹:
RLE-6TN大鼠肺泡II型細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:panc02小鼠胰腺癌細(xì)胞貼壁生長多角panc02:panc02小鼠細(xì)胞系組織來源:胰腺小鼠血小板因子4(PF4)elisa檢測試劑盒大鼠類風(fēng)濕因子(RF)elisa檢測試劑盒
詳情介紹:

細(xì)胞接收后的處理:


1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。

RLE-6TN大鼠肺泡II型細(xì)胞


英文簡稱

規(guī)格

貨號

RLE-6TN:RLE6TN

1×106

P-X1147

產(chǎn)品詳情:


細(xì)胞別稱:RLE-6TN

種屬來源:大鼠

年齡性別:雄,56

組織來源:肺

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

背景簡介:RLE-6TN(大鼠肺上皮-T-抗原陰性)細(xì)胞系來源于使用鏈霉蛋白酶溶液氣道灌注從 56 天大的雄性 F344 大鼠中分離的肺泡 II 型細(xì)胞。SV40-T 抗原的表達(dá)通過核染色和 PCR 呈陰性,表明該細(xì)胞是通過自發(fā)永生化衍生的。

生物等級:1

細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測:無

基因表達(dá)情況:

保藏機(jī)構(gòu):ATCC

培養(yǎng)基:RPMI-1640 +10% FBS+1%P/S

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。


一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:

1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例:
1、細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實驗原理:


公司正在出售的產(chǎn)品:

FITC標(biāo)記人CD42b單克隆抗體 human CD42b/FITC

四分子交聯(lián)體5/四旋蛋白5/四次跨膜蛋白5抗體 TSPAN5

FMS樣酪氨酸激酶3配體抗體 FLT3L

20號染色體開放閱讀框100抗體 GCX1/C20orf100

硫氧還蛋白相關(guān)跨膜蛋白2抗體 TMX2

RASL11B蛋白抗體 RASL11B

球蛋白超家族成員12抗體 IGSF12

PRDM10k單克隆抗體 PRDM10

3號染色體開放閱讀框38抗體 C3orf38

糖蛋白β-1B抗體 Hemopexin

肌球蛋白1H抗體 MYO1H

巖藻糖轉(zhuǎn)移酶8抗體 FUT8

畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1抗體 Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1

蛋白酶體抑制劑亞基PI31抗體 PSMF1

血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 VEGFR2

凋亡相關(guān)蛋白2重組兔單克隆抗體 PDCD2

大鼠3氧代5α類固醇4脫氫酶2(SRD5A2)elisa分析檢測試劑盒

FC段γ受體3/球蛋白G Fc段受體III單克隆抗體 CD16

小鼠成神經(jīng)細(xì)胞瘤RAS 病毒(v-ras)癌基因源物elisa檢測試劑盒

FITC標(biāo)記小鼠CD49e單克隆抗體 mouse/rat CD49e/FITC

原果膠含量測試盒

磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體 PI 3 Kinase Class 3

通用型RFLP基因分析試劑盒

球蛋白D重鏈保守區(qū)抗體 IGHD

小鼠胃泌素(GAS)elisa檢測試劑盒

組蛋白脫乙?;?span>5HDAC5)活性比色法定量檢測試劑盒

大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa分析檢測試劑盒

RLE-6TN大鼠肺泡II型細(xì)胞人脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2Lp-PLA2elisa檢測試劑盒

ES1蛋白系物,線粒體(C21orf33/HES1/KNPI)elisa分析檢測試劑盒

小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)elisa檢測試劑盒

組織多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒

大鼠彈性蛋白(ELN)elisa檢測試劑盒

實驗步驟:


1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板,轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。



姓名:
電話:
您的需求: